John Stock – Chuyên gia hỗ trợ kỹ thuật cao cấp của Leica Biosystems cung cấp hướng dẫn toàn diện về cách đạt được kết quả cắt lạnh tốt nhất. John Stock sẽ trình bày về cách lắp đặt và cài đặt thiết bị, chuẩn bị mô mẫu, đông lạnh mô và cắt lát mô chất lượng

Q&A về kỹ thuật cắt lạnh dùng trong nghiên cứu

Dưới đây là phần Q&A của John Stock bao gồm lời khuyện về việc làm rách mô, giữ mẫu ở nhiệt độ thấp khi làm việc và ưu tiên high hoặc low-profile.

1. Tips để cắt các phần ở nhiệt độ -20 °C để dán vào lam kính cũng phải ở nhiệt độ -20 °C đối với các mẫu không thể làm ấm cho các ứng dụng tiếp theo không?

Một trong những vấn đề chính với các lam kính lạnh là chúng có thể thu hút độ ẩm. Chúng thường ở gần phía trước của buồng đông lạnh và được di chuyển xung quanh trong cột không khí, điều này sẽ thu hút độ ẩm và độ ẩm giữa mẫu và kính có thể cản trở việc dán lam. Vì vậy, hãy cố gắng đảm bảo rằng lam kính khô và không có độ ẩm. Khi đang làm việc trong buồng lạnh, độ ẩm từ hơi thở của người dùng cũng có thể đi về phía trước vào buồng. Vì vậy, cần đóng buồng lại, đồng thời điều này cũng có thể giúp giữ lại độ ẩm trong buồng bên trong và vẫn tuần hoàn.

2. Nhiệt độ phải giảm nhanh như thế nào từ -20°C xuống -50°C khi sử dụng chức năng đông lạnh mẫu nhanh của CM3050S và điều này có quan trọng để đạt được kết quả không?

Điều này đề cập đến mẫu: chức năng đông lạnh mẫu có thể giảm xuống đến -50°C – không quan trọng. Bởi vì đó là vùng rất nhỏ mà nó đang làm lạnh và nó sẽ nguội xuống không quá 4h. Vì mẫu được đông lạnh đã ở mức -20 °C, việc giảm xuống -50 °C có thể mất khoảng 15 phút đến nửa giờ tùy thuộc vào nhiệt độ buồng, nhưng nó sẽ nguội rất nhanh vì đó là hệ thống làm mát riêng biệt cho mẫu

3. Liên quan đến giới hạn khoảng cách đến các thiết bị khác khi bố trí máy cắt lạnh trong phòng thí nghiệm, điều này có áp dụng cho máy cắt lạnh kích thước lớn như Leica Biosystems CM3600 không?

Máy cắt lạnh kích thước lớn có thể làm lạnh toàn bộ rhesus monkey, như Leica Biosystems CM3600S. Khoảng cách xung quanh máy cắt lạnh có thể không cần thiết cho hoạt động của hệ thống làm lạnh vì nó được tích hợp hệ thống buồng lạnh kép. Cửa máy mở từ một phía, nhưng để có thể làm việc hoặc đi lại xung quanh thiết bị, tôi cho rằng cần ít nhất một feet xung quanh toàn bộ thiết bị, để có đủ không khí mát có thể tiếp cận các mặt sau và các lỗ thông hơi làm lạnh trên thiết bị.

4, Mực sử dụng trong quá trình vùi mô có ảnh hưởng gì đến bất kỳ ứng dụng nào không?

Chúng tôi không thể đảm bảo điều đó. Mực ở đó để giúp xác định các vùng mô và một số sắc tố đó có thể có tác động sau này khi mực khô. Vì vậy, tôi không chắc chắn và tôi phải xem các tờ SDS để xem dung môi nào giúp phân tán sắc tố, ví dụ, nếu đó là dầu hoặc thường chỉ là cồn hoặc nước, nhưng khi dung môi đó bốc hơi, và tôi không chắc điều đó sẽ diễn ra nhanh như thế nào, nó vẫn sẽ để lại sắc tố và các sắc tố có thể là các mảnh vụn nền có thể xuất hiện trên các mẫu sau này.

5. Về thanh chống cuộn, nó có thể gây cản trở khi bạn lấy phần cắt, hoặc đôi khi nó không hỗ trợ việc lấy phần cắt và bị cuộn lại. Làm thế nào để bạn khắc phục vấn đề này?