Định nghĩa
là thuật ngữ dùng để chỉ nhiều kỹ thuật nhuộm thay thế được sử dụng khi truyền thống không cung cấp tất cả thông tin mà nhà nghiên cứu bệnh học từ một mẫu mô. là các quy trình thường sử dụng thuốc nhuộm hoặc hóa chất có ái lực với thành phần mô cụ thể cần được chứng minh. Chúng cho phép quan sát sự hiện diện/hoặc vắng mặt của một số loại tế bào, cấu trúc và/hoặc vi sinh vật nhất định bằng kính hiển vi. tồn tại rất lâu trước khi có kỹ thuật hóa mô miễn dịch (IHC) và/hoặc kỹ thuật sinh học phân tử (máy dò).
Mô liên kết – Giới thiệu
Mô liên kết hỗ trợ cơ thể bằng cách cung cấp một chất nền kết nối và liên kết các tế bào và cơ quan. Có ba loại mô liên kết trong cơ thể.
Collagen là một loại protein mạnh và là thành phần chính của dây chằng và gân. Nó cũng chịu trách nhiệm về độ đàn hồi của da và là loại dễ thấy nhất có thể được thể hiện qua .
Các sợi đàn hồi nằm ở da và thành mạch máu. Chúng được cấu tạo từ Elastin – một loại protein linh hoạt và cho phép nhiều mô trong cơ thể lấy lại hình dạng ban đầu sau khi giãn ra hoặc co lại và không thể nhìn thấy được qua .
Các sợi lưới được cấu tạo từ collagen và tạo thành một khung mỏng manh xung quanh các sợi thần kinh, tế bào mỡ, hạch bạch huyết, các sợi cơ trơn và cơ xương. Chúng cũng không nhìn thấy được khi nhuộm
Các vết nhuộm được sử dụng phổ biến nhất để xác định mô liên kết
Ba màu – Masson
Ba loại thuốc nhuộm được sử dụng để nhuộm chọn lọc bao gồm cơ (đỏ), sợi collagen (xanh), hồng cầu (đỏ) và nhân (đen).
Thuốc nhuộm được sử dụng để nhuộm sinh thiết gan nhằm xác định mức độ xơ hóa như trong bệnh xơ gan cũng như sinh thiết thận để làm nổi bật màng đáy và chứng minh sự lắng đọng miễn dịch. Thuốc nhuộm cũng được sử dụng để phân biệt giữa cơ trơn và collagen trong khối u và xác minh sự gia tăng collagen.
Quy trình
Kết quả
Cách thức
Thời gian ủ có thể thay đổi theo hướng dẫn của nhà sản xuất
1. | Đặt lam kính xuống nước | |
2. | Ủ trong Bouin’s – hoạt động như chất gắn màu để liên kết thuốc nhuộm với mô. | |
|
Thường qua đêm | |
|
10-15 phút | |
3. | Rửa sạch dưới vòi nước để loại bỏ hết dấu vết của Bouin’s | |
4. | Hematoxylin của Weigert | 5-10 phút |
5. | Rửa sạch dưới vòi nước | 5 phút |
6. | Biebrich đỏ tươi | 15 phút |
7. | Rửa sạch dưới vòi nước | |
8. | Axit Phosphotungstic-phosphomolybdic | 15 phút |
9. | Thành màu xanh anilin (không cần rửa) | 5 phút |
10. | Axit axetic băng 1% | 1-3 phút |
11. | Rửa sạch dưới vòi nước | |
12. | Khử nước, làm sạch và dính kết |
Xử lý Trichrome:
Điều cần thiết là sử dụng Bouin tốt với thời gian ủ thích hợp ở nhiệt độ thích hợp được sử dụng. Phân biệt hoàn toàn bằng axit Phosphotungstic-phosphomolybdic của collagen đến mức loại bỏ hết màu đỏ. Nếu cơ có màu đỏ nhạt, hãy kiểm tra khả năng tồn tại của Bouin’s và/hoặc Biebrich đỏ tươi. Nếu collagen quá nhạt, hãy giảm thời gian ủ trong Glacial Acetic Acid (GLAA) 1%.
One Step Trichrome – Gomori’s
Một giải pháp nhuộm tất cả: cơ, sợi collagen, fibrin và hồng cầu. Có hai công thức nhuộm collagen: xanh dương và xanh lá cây.
Quy trình
Kết quả
Cách thức
Thời gian ủ có thể thay đổi theo hướng dẫn của nhà sản xuất.
1. | Đặt lam kính xuống nước | |
2. | Ủ trong Bouin’s – hoạt động như chất gắn màu để liên kết thuốc nhuộm với mô | |
|
thường là qua đêm | |
|
10-15 phút | |
3. | Rửa sạch dưới vòi nước chảy để loại bỏ hết dấu vết của Bouin’s | |
4. | Hematoxylin của Weigert | 5-10 phút |
5. | Rửa sạch dưới vòi nước chảy | 5 phút |
6. | Giải pháp xanh/xanh một bước | 15 phút |
7. | Axit axetic băng thẳng đến 1% | 1 phút |
8. | Rửa sạch dưới vòi nước chảy | |
9. | Khử nước, làm sạch và gắn kết |
Nhuộm đàn hồi Verhoeff-van Gieson
Nhuộm đàn hồi Verhoeff-van Gieson được sử dụng để xác định tình trạng teo mô đàn hồi như trong khí thũng, bằng chứng về các bệnh mạch máu (xơ cứng động mạch) và sự xâm lấn của khối u vào mạch máu.